Kỹ thuật nhuộm Gram phân loại vi khuẩn trong bùn hoạt tính

Việc nhuộm Gram giúp kỹ thuật viên quan sát rõ hơn hình thái và đặc điểm vách tế bào của vi sinh vật. Trong bể Aerotank, phần lớn vi khuẩn tạo bông hữu ích là vi khuẩn Gram âm. Ngược lại, nhiều loại vi khuẩn dạng sợi gây nở bùn lại thuộc nhóm Gram dương. Việc thực hiện kỹ thuật nhuộm Gram vi khuẩn nước thải giúp bạn đưa ra chiến lược kiểm soát vi sinh chính xác. Quy trình này đòi hỏi sự tỉ mỉ nhưng mang lại kết quả chẩn đoán rất tin cậy.

[Image: Steps of Gram staining procedure in a wastewater laboratory]

1. Chuẩn bị dụng cụ và hóa chất

Bạn cần chuẩn bị bộ nhuộm Gram tiêu chuẩn bao gồm bốn loại dung dịch chính.

• Crystal Violet: Thuốc nhuộm sơ cấp (màu tím).

• Dung dịch Lugol (Iodine): Chất cố định màu.

• Cồn 95% hoặc Acetone: Chất tẩy màu.

• Safranin: Thuốc nhuộm bổ sung (màu hồng/đỏ).

• Dụng cụ: Lam kính, đèn cồn, que cấy và kính hiển vi độ phóng đại $1000x$ (với dầu soi).

2. Quy trình thực hiện nhuộm Gram 4 bước

Hãy thực hiện các bước sau một cách tuần tự để tránh sai lệch kết quả màu sắc.

1. Cố định mẫu: Phết một lượng nhỏ bùn lên lam kính và để khô tự nhiên. Hơ nhẹ qua ngọn lửa đèn cồn để cố định vi sinh vật lên bề mặt kính.

2. Nhuộm chính: Nhỏ Crystal Violet lên mẫu trong $1$ phút rồi rửa nhẹ bằng nước. Sau đó nhỏ dung dịch Lugol trong $1$ phút để tạo phức chất màu tím bền vững.

3. Tẩy màu: Đây là bước quan trọng nhất. Nhỏ cồn $95\%$ lên lam kính cho đến khi dòng cồn chảy ra không còn màu tím (khoảng $10 – 30$ giây). Sau đó rửa ngay bằng nước để dừng quá trình tẩy.

4. Nhuộm bổ sung: Nhỏ Safranin trong khoảng $30$ giây đến $1$ phút rồi rửa sạch, để khô và soi dưới kính hiển vi.

[Image: Gram-positive (purple) and Gram-negative (pink) bacteria under microscope]

3. Đọc và phân tích kết quả

Dưới ống kính hiển vi, màu sắc của vi khuẩn sẽ cho bạn biết đặc tính của chúng.

• Vi khuẩn Gram dương (Purple): Giữ được màu tím của Crystal Violet do vách tế bào Peptidoglycan dày. Nhiều loài vi khuẩn dạng sợi gây khó lắng thuộc nhóm này.

• Vi khuẩn Gram âm (Pink/Red): Bị mất màu tím khi tẩy cồn và bắt màu hồng của Safranin. Đa số các vi khuẩn phân hủy chất hữu cơ có lợi trong /quy-trinh-xu-ly-nuoc-thai-sinh-hoat là Gram âm.

Nếu mẫu nhuộm có quá nhiều vi khuẩn Gram dương dạng sợi, bạn có thể cần điều chỉnh tăng chỉ số $DO$ hoặc kiểm tra lại nồng độ dinh dưỡng. Việc nhuộm Gram định kỳ giúp bạn lập bản đồ hệ vi sinh vật của trạm xử lý. Từ đó, bạn sẽ chủ động hơn trong việc đối phó với các sự cố bùn nổi hoặc bùn mịn. Một kỹ thuật viên am hiểu phương pháp nhuộm sẽ giúp tối ưu hóa công tác quản lý vi sinh một cách chuyên nghiệp.

Bài viết liên quan:

Xút – NaOH: Tính chất vật lý, hóa học, ứng dụng và phân loại

Xút - NaOH: Tính chất vật lý, hóa học, ứng dụng và phân loại Xút hay xút ăn da là hóa chất vô cơ có công thức hóa học $NaOH$. Tên gọi thương mại phổ biến là Caustic Soda Flakes hoặc Sodium Hydroxide. Đây là hóa chất điều chỉnh $pH$ quan trọng cho /quy-trinh-xu-ly-nuoc-thai-sinh-hoat. 1. Tính chất vật lý và

Hóa chất khử trùng

Hóa chất khử trùng Chlorine 70% (Calcium Hypochlorite) Chlorine 70% là hóa chất khử trùng và tẩy trắng có tính oxy hóa cực mạnh. Sản phẩm đóng vai trò quan trọng trong việc tiêu diệt vi khuẩn và vi sinh vật. Đây là hóa chất diệt khuẩn phổ biến cho /quy-trinh-xu-ly-nuoc-thai-sinh-hoat. 1. Thông tin chung và đặc tính kỹ thuật

Đèn diệt khuẩn UV – Cấu tạo, cơ chế và ứng dụng xử lý nước

Đèn diệt khuẩn UV - Cấu tạo, cơ chế và ứng dụng xử lý nước Đèn diệt khuẩn UV là thiết bị khử trùng nước tiên tiến và an toàn. Thiết bị sử dụng tia cực tím để triệt tiêu vi sinh vật mà không dùng hóa chất. Đây là công đoạn diệt khuẩn quan trọng cho /quy-trinh-xu-ly-nuoc-thai-sinh-hoat. 1. Cơ

HÓA CHẤT PAC – POLY ALUMINIUM CHLORIDE

HÓA CHẤT PAC - POLY ALUMINIUM CHLORIDE Hóa chất PAC là gì? PAC là viết tắc của Poly Alumunium Chloride. PAC là loại phèn nhôm có công thức cao phân tử là [Al2(OH)nCl6-n]m có tác dụng keo tụ tạo bông trợ lắng, nó thay thế cho phèn nhôm sunfat. PAC được sử dụng phổ biến trong việc xử lý nước

Vật liệu lọc nước – Đặc tính kỹ thuật và ưu điểm vượt trội

VẬT LIỆU LỌC NƯỚC, ĐẶC TÍNH KỸ THUẬT, ƯU ĐIỂM VƯỢT TRỘI, GIÁ THÀNH CẠNH TRANH Các loại vật liệu lọc thường được sử dụng trong hệ lọc nước thô là: sỏi lọc, cát lọc, cát mangan, vật liệu lọc đa năng ODM – 2F, ODM – 5F , hạt Birm… Ưu điểm nổi trội của vật liệu lọc là dễ

Men vi sinh xử lý nước thải chính hãng chất lượng hàng đầu

Men vi sinh xử lý nước thải chính hãng chất lượng hàng đầu Men vi sinh là giải pháp sinh học tối ưu giúp cải thiện hiệu quả hệ thống xử lý. Việc bổ sung chế phẩm sinh học giúp phân hủy nhanh các chất bẩn ô nhiễm. Đây là phương pháp cốt lõi để nâng cao chất lượng cho

Vật liệu lọc – Than hoạt tính

Vật liệu lọc - Than hoạt tính (Activated Carbon) Than hoạt tính là vật liệu lọc cốt lõi trong xử lý chất lỏng và không khí. Với khả năng hấp phụ vượt trội, vật liệu này giúp nâng cao hiệu quả các hệ thống lọc. Việc sử dụng than hoạt tính đóng vai trò quan trọng trong /quy-trinh-xu-ly-nuoc-thai-sinh-hoat. 1. Thông

Những thay đổi mới nhất trong quy định về quan trắc môi trường

Những thay đổi mới nhất trong quy định về quan trắc môi trường ​Luật Bảo vệ Môi trường 2020 và Nghị định 08/2022/NĐ-CP mang lại nhiều thay đổi lớn. Các quy định mới giúp tối ưu hóa công tác giám sát xả thải của doanh nghiệp. Doanh nghiệp cần nắm rõ để điều chỉnh hoạt động cho đúng pháp luật.